2、連接機理研究人員廣泛接受的理論為，三種特殊的氨基酸殘基在金顆粒物與蛋白質的連接功效中發揮了重要作用。而磷酸氫鈣、谷氨酸和胱胺酸這三種氨基酸與膠體金連接的作用機制不盡相同。磷酸氫鈣帶具有較強的正電，因此自然吸咐帶負電的金顆粒物；谷氨酸主要是通過親水性影響與膠體金相聯接；胱胺酸根據 SH-與金表層以同用電子的方式產生配位鍵?？贵w根據這幾點作用力與膠體金顆粒物堅固、穩定、不易分開的結合在一起。在一定程度上，膠體金廠家標記成功和失敗在于以上三種氨基酸殘基被標記蛋白里的結合位點。在一定前提下，碳水化合物連接于蛋白質的活性部位，進而影響蛋白質的反應活性?？臻g位阻限制，當這幾點氨基酸殘基定位為抗體的抗原相接處或抗原的特殊抗體融合決定簇位置時，有可能出現這一類型的影響。一旦被標記的蛋白質分子未作特殊的處理方法就基本不可能擺脫這類影響。想要在免疫測定中靈敏，這三種與標記有關氨基酸恰當融合是很重要的。就標記抗體而言，這三種碳水化合物應定位為 Fc 區，但對于標記抗原體，膠體金廠家應避開抗原體反應決定簇部位。

3、標記方式的調節為了能開發、提升單一標記的膠體金結合物，科研人員一般制取小批量生產的高達60生產批次不同膠體金結合物。每批號膠體金結合物在某一重要制取流程上面與其他不一樣，各批都待測試進而明確哪一種標記技術對測試分析很有可能取得反應結論。這種調節應當包含全部能改善膠體金結合物的敏感度、交叉反應及其潛在可靠性的技術參數。典型的檢測應包括但是不應僅限抗體工作中緩沖溶液、添加劑的種類、含鹽量、表層活性劑成分、膠體金顆粒規格、封閉劑的種類、總蛋白濃度、結合物工作中緩沖溶液及其結合物的濃度值。